趣天学塘 QTXT

随性、随时、随心
点点滴滴的生活记录
在寻找诗和远方的路上
一手机、一相机、一电脑、一本书、一个人、一世界、一生
@ since 2012
Attitude Determines Altitude!

雪，曲径通幽处。

2018-11-20

非常妙的设计，赞👍

2018-11-13

冷

2018-11-13 1

博乐下雪了，温度骤降至零下

2018-11-13

关于转染的几个疑问[转]

首先要确定是要做瞬时转染还是稳定转染？

若为瞬时转染，就是一次性转染完毕后检测分析目标的基因表达或者蛋白．

若为稳定转染，应先判断是用质粒进行转染还是用慢病毒进行转染。如果选择质粒，就得根据你用的质粒选择筛选药物，做药物筛选浓度就得两个礼拜左右（在做转染之前应先确定最佳筛选浓度）。转染后，将转染的细胞进行药物筛选，挑选出单克隆细胞群．再分个在９６孔板，然后继续扩增培养．

.下面为有关脂质体2000转染的资料：

LIPOFECTAMINE 2000 转染 293 细胞方案

1) 转染前一天用胰蛋白酶消化下细胞并重新计数，以每孔2 x 105的密度接种于24孔的培养板中，每孔加...

2018-10-24

瞬时转染 vs 稳定转染

瞬时转染是指转染之后几天之内检测目的基因的表达情况；

稳定转染是指转染之后用相应的药物，例如G418, Zeocin, puromycin等处理细胞，获得目的基因稳定表达的细胞。一般周期比较长，至少需要6~8周。

稳定转染也可以用真核质粒转染细胞，例如pcDNA3.1+,pcDNA3.1/Zeocin等载体。

用病毒转染细胞后，几天之内检测目的基因的表达，之后不做任何处理的话，也属于瞬时转染。

2018-10-24

瞬时转染

瞬时转染是指转染之后几天之内检测目的基因的表达情况；

稳定转染是指转染之后用相应的药物，例如G418, Zeocin, puromycin等处理细胞，获得目的基因稳定表达的细胞。一般周期比较长，至少需要6~8周。

稳定转染也可以用真核质粒转染细胞，例如pcDNA3.1+,pcDNA3.1/Zeocin等载体。

用病毒转染细胞后，几天之内检测目的基因的表达，之后不做任何处理的话，也属于瞬时转染。

2018-10-24

细菌和其它原核生物一样，没有核膜，DNA集中在细胞质中的低电子密度区，称核区或核质体（nuclear body）。细菌一般具有1-4个核质体，多的可达20余个。核质体是环状的双链DNA分子，所含的遗传信息量可编码2000～3000种蛋白质，空间构建十分精简，没有内含子。由于没有核膜，因此DNA的复制、RNA的转录与蛋白的质合成可同时进行，而不像真核细胞那样这些生化反应在时间和空间上是严格分隔开来的。每个细菌细胞约含5000～50000个核糖体，部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中。细菌核糖体的沉降系数为70S，由大亚单位（50S）与小亚单位（30S）组成，大亚单位...

2018-10-24 1